跳骨片调控Wnt/β-catenin信号通路延缓骨关节炎关节软骨退变的机制研究

目的:探讨跳骨片调控Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路保护骨关节炎关节软骨的机制.方法:将30只2月龄雄性SD大鼠随机分为空白对照组、模型对照组、跳骨片组,每组10只.采用改良Hulth法建立骨关节炎动物模型.造模成功后跳骨片组给予跳骨片0.32 g·kg-1·d-1灌胃,空白对照组和模型对照组给予等量生理盐水灌胃,干预12周后取大鼠关节软骨.Real-time PCR检测关节软骨β-catenin、Frizzled-2、GSK-3β、CKIεmRNA表达,Western blot法检测关节软骨CKIε、CollagenⅡ、PGS1蛋白表达,Massion染色法观察3组关节软骨胶原的表达及形态变化.结果:Real-time PCR结果显示,与空白对照组比较,模型对照组关节软骨β-catenin、Frizzled-2、CKIεmRNA表达明显上升(P<0.05,P>0.05,P<0.05),而GSK-3βmRNA表达明显下降(P<0.05);与模型对照组比较,跳骨片组关节软骨β-catenin、Frizzled-2、CKIεmRNA表达明显下降(P<0.05,P>0.05,P<0.05),而GSK-3βmRNA表达明显上升(P<0.05).Westernblot结果显示,与空白对照组比较,模型对照组关节软骨CKIε蛋白表达明显升高(P<0.05),而CollagenⅡ、PGS1蛋白表达明显降低(P<0.05,P<0.01);与模型对照组比较,跳骨片组关节软骨CKI-ε蛋白表达明显降低(P<0.05),CollagenⅡ、PGS1蛋白表达明显升高(P<0.01,P>0.05).Massion染色结果显示,空白对照组和跳骨片组关节软骨结构清晰,软骨层染色明显,软骨组织呈淡蓝色,胶原含量较高;模型对照组软骨层结构紊乱,染色较浅,胶原含量低.结论:跳骨片能调控Wnt/β-catenin信号通路抑制骨关节炎炎症反应,促进细胞外基质的合成,保护关节软骨.